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棕櫚酸,又叫軟脂酸,是一種高級飽和脂肪酸。有機(jī)物,不溶于水,易溶于乙醚、氯仿和醋酸,在自然界中廣泛存在,可用于生產(chǎn)蠟燭、肥皂、潤滑劑、洗滌劑等。烏桕種子的烏桕油中,軟脂酸的含量可高達(dá)60%以上,棕櫚油中含量大約為40%。檢測樣品中的棕櫚酸含量,對于科研方面有重要的研究價值。
檢測樣品中的棕櫚酸含量,主要的方法有高效液相色譜(HPLC)法、紫外分光光度法、氣相色譜(GC)法、氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)法等。
1.HPLC法
在使用HPLC檢測樣品中棕櫚酸含量的時候,用的檢測器是CAD檢測器,色譜柱是C18的硅膠色譜柱,梯度洗脫,流速為0.5ml/min,柱溫35℃。使用這種方法檢測棕櫚酸,能夠表現(xiàn)出良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)可以達(dá)到0.99以上,RSD低于2.0%,能夠滿足絕大多數(shù)的檢測需求。操作步驟包括:樣品處理-檢測條件的設(shè)置-標(biāo)準(zhǔn)曲線制作-樣品檢測-結(jié)果計算和分析等。
2.紫外分光光度法
這個方法好,它是利用異辛醇和棕櫚酸之間發(fā)生關(guān)系,也就是酯化反應(yīng),產(chǎn)物是棕櫚酸異辛酯。對這個產(chǎn)物使用分光光度計測定吸光度值,發(fā)現(xiàn)可以獲得最大的吸光度。通過對標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行測定,以濃度為橫坐標(biāo),以吸光度值為縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線,并計算出相關(guān)系數(shù)。根據(jù)對樣品檢測得到的吸光度值,可以計算出樣品中含有的棕櫚酸的濃度,這是一種反向的推算方法,操作起來比較簡單。而且,現(xiàn)在市面上也有不少的地方使用試劑盒,看說明書的方法,有標(biāo)準(zhǔn)可依據(jù),比較適合大多數(shù)人群的需求,特別高校、科研機(jī)構(gòu)。
3.氣相色譜(GC)法
為什么會用到GC法測定棕櫚酸呢,這就是因為棕櫚酸是一種有機(jī)物,不溶于水,但溶于乙醚等有機(jī)物。通過使用GC的方法,進(jìn)樣檢測樣品中棕櫚酸,通過甲酯化后使用面積歸一化法測含量。用聚乙二醇(或極性相近)為固定液的毛細(xì)管柱;起始溫度為170℃,以每分鐘3℃的速率升溫至230℃,維持5分鐘;進(jìn)樣口溫度為230℃;檢測器溫度為250℃。為了實現(xiàn)更精準(zhǔn)的檢測結(jié)果,也有用到GC-MS法測定棕櫚酸含量。
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