黃酮類(lèi)化合物屬于植物的次生代謝產(chǎn)物，在植物界分布很廣，大多數(shù)情況下和糖苷鍵結(jié)合成苷類(lèi)或碳糖基，有的還以游離形式存在。黃酮的藥用作用實(shí)在太多了，比如預(yù)防心腦血管疾病等。黃酮類(lèi)化合物在植物體內(nèi)的形成，是由葡萄糖經(jīng)過(guò)莽草酸途徑和乙酸-丙二酸途徑，生成羥基桂皮酸和三個(gè)分子的乙酸，然后合成查爾酮，再衍生出各類(lèi)的黃酮類(lèi)化合物。

測(cè)定槐花中的總黃酮含量，其基本原理是：利用溶液中的鋁離子和總黃酮中的羥基或甲氧基發(fā)生絡(luò)合作用，在強(qiáng)酸的條件下形成穩(wěn)定的有色絡(luò)合物。最后，利用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定產(chǎn)物的吸光度，并使用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出槐花中的總黃酮含量。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定，分別稱(chēng)取對(duì)照品1,2,3,4,5,6mL，各自放在25mL容量瓶中，加水到6.0mL，加亞硝酸鹽溶液，混勻后加入硝酸鋁溶液，再加入氫氧化鈉溶液，最后加水定容到刻度。以空白試劑為對(duì)照，在分光光度計(jì)500nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。以測(cè)定的吸光度值為縱坐標(biāo)，以對(duì)照品對(duì)應(yīng)濃度為橫坐標(biāo)，繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算出回歸方程。

對(duì)樣品進(jìn)行處理，將槐花粉碎，加入甲醇，超聲30min后過(guò)濾，精密吸取10mL，加水定容至100mL的容量瓶中備用。檢測(cè)的方法，和標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定吸光度的步驟相似，根據(jù)測(cè)定的吸光度值，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出樣品中的總黃酮含量。

注意事項(xiàng)：樣品精確稱(chēng)量，避免出現(xiàn)誤差。在強(qiáng)酸的條件下進(jìn)行反應(yīng)，要注意安全，避免出現(xiàn)腐蝕。