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植物硝酸鹽含量的測定
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時間: 2024-05-27 | 272 次瀏覽 | 分享到:

自然界中的硝酸鹽主要是固氮菌在固氮的時候形成的,也有時候,電閃雷鳴會讓空氣中的氮氣和氧氣結(jié)合形成氮氧化合物,溶于雨水并和地面上的礦物質(zhì)發(fā)生反應生成硝酸鹽。硝酸鹽可以給植物充足的氮肥,氮元素不僅是氨基酸和蛋白質(zhì)的主要成分,還可以合成葉綠素,促進光合作用。因此,如果植物在生長的過程中缺少了氮元素,葉子就會出現(xiàn)變黃枯萎的現(xiàn)象。



檢測植物體內(nèi)的硝酸鹽含量,常用比色法檢測。當然,為了更準確的檢測,也有用到光譜法,色譜法,電化學法等。


比色法檢測的原理是:在濃酸的條件下,硝酸根離子和水楊酸發(fā)生反應,生成硝基水楊酸。生成的硝基水楊酸,在堿性的條件下呈黃色,最大吸收峰波長410nm。在一定的濃度范圍內(nèi),顏色和含量是呈正比的,就根據(jù)這個線性關系,采用比色法測定標準曲線。對樣品進行處理,并在相同的條件下反應并上機檢測,測定的結(jié)果根據(jù)標準曲線,計算出植物樣品中的硝酸鹽含量。



因此,這里需要準備的溶液就有:硝氮-N標準溶液,5%水楊酸-硫酸溶液,8%氫氧化鈉溶液。下面,一個比較關鍵的步驟就是制作標準曲線。分別吸取一定量的硝氮-N標準溶液,分7個梯度稀釋定容,制備成10ug/mL,20ug/mL,40ug/mL,60ug/mL,80ug/mL,100ug/mL,120ug/mL的標準溶液。分別吸取以上的標準溶液,在分光光度計上測定,以0.1mL去離子水做空白對照。每個都加入0.4mL的5%水楊酸-硫酸溶液,搖勻,在室溫下20min,再加入8%NaOH溶液9.5mL,搖勻后冷卻至室溫。在410nm的波長下,測定吸光度。以標準溶液濃度為橫坐標,以吸光度值為縱坐標,繪制成標準曲線并計算回歸方程。


有了標準曲線,就要對樣品進行處理和測定。我們的樣品是植物,將植物組織剪碎混勻,精確稱量2-3g,放入刻度試管中,加入10mL的去離子水,放在沸水浴中提取30min,之后用自來水冷卻,將提取液過濾,定容到25mL的刻度。按照上面標準品處理的過程和步驟,依次加入水楊酸,冷卻,NaOH溶液,并在分光光度計上測定其吸光度。根據(jù)標準曲線,計算出樣品中的硝酸鹽含量。


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