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三七總皂苷是從三七中提取出來的,主要成分包括人參皂苷Rb1,人參皂苷Rg1,三七皂苷R1等。它具有良好的化學(xué)性質(zhì)和藥理作用,如抗氧化,活血化瘀,通脈活絡(luò),抗凝血等。三七是一味上好的中藥材,是五加科人參屬多年生草本植物,分布于云南,廣西等地。它生長在溫暖,濕潤的環(huán)境中,以疏松且富含有機(jī)質(zhì)的中性或酸性砂質(zhì)土壤為主,需要有豐富的腐殖質(zhì)來提供營養(yǎng)。為什么叫三七呢?根據(jù)《本草綱目拾遺》記載,每根莖上有7個葉子,下面生了3條根,所以稱為“三七”。它的莖,葉,花,果都可以入藥。
檢測方法有好幾種,如果單獨的測三七皂苷R1,人參皂苷Rg1,Re,Rd等成分,可以選擇高效液相色譜(HPLC)法,以C18的色譜柱,乙腈-水為流動相,梯度洗脫,流速1-1.5ml/min,紫外檢測器,波長203nm,進(jìn)樣量10-20uL,實現(xiàn)精準(zhǔn)定量。為了更快速的檢測出總皂苷的含量,滿足科學(xué)實驗的要求,一般葉會采用紫外分光光度法,以標(biāo)準(zhǔn)曲線的形式計算出三七總皂苷的含量。
1.提取和凈化
獲取干燥的植物樣本,進(jìn)行粉碎,過篩,用75%的乙醇,在室溫下浸提3次,合并提取液后減壓蒸干。也可以用超聲波輔助提取,以提高處理效率。凈化過程,是通過大孔徑的吸附樹脂柱,先用蒸餾水沖洗雜質(zhì),后用60%乙醇洗出皂苷,收集洗出液定容,待測。
2.標(biāo)準(zhǔn)曲線
先要找個三七總皂苷的對照品,用它來稀釋到適當(dāng)?shù)?-7個濃度。分別加入1ml的濃硫酸,80℃水浴1h進(jìn)行顯色反應(yīng)呈紫紅色,冷卻后用甲醇定容。用紫外分光光度計203nm的波長下,測定各個濃度的吸光度值,為了準(zhǔn)確起見,也可以多測2-3個重復(fù),求取平均值。以濃度和對應(yīng)的吸光度值數(shù)據(jù),繪制出濃度-吸光度值的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3.樣品測定和計算
吸取適當(dāng)?shù)臉悠诽崛∫?,按?biāo)準(zhǔn)曲線的方式,對樣品進(jìn)行顯色反應(yīng)。可以用2-3個平行,以空白樣為對照,在紫外分光光度計上讀取吸光度值,計算出平均值。將這個數(shù)值,帶入到標(biāo)準(zhǔn)曲線,是可以計算出三七總皂苷的含量的。
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