維生素K是一種具有葉綠醌生物活性的維生素，具有異戊二烯類(lèi)側(cè)鏈的萘醌類(lèi)化合物，它包括了k1，k2，k3，k4等幾種形式。其中，k1，k2是天然存在的，是脂溶性維生素。維生素k的性質(zhì)是比較穩(wěn)定，耐熱，耐酸。但在光下敏感，容易被紫外線分解。維生素k1和k2不溶于水，但溶于甲醇，丙酮，苯，石油醚，氯仿等有機(jī)溶劑。而維生素k3和k4是水溶性的，溶于四氯化碳，氯仿，乙醇等。含維生素k1比較高的蔬菜和水果有菠菜，香菜，萵苣，藕，西紅柿，獼猴桃，藍(lán)莓等，另外在蛋黃和大豆油中也有發(fā)現(xiàn)。

科研實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)樣品中的維生素k含量，一般會(huì)用到高效液相色譜（HPLC）法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）法、熒光檢測(cè)法，酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法等

以HPLC測(cè)維生素K1為例，簡(jiǎn)單的介紹一下檢測(cè)流程。它的原理：樣品中的維生素K1經(jīng)有機(jī)溶劑提取后，經(jīng)失活的磷酸鹽處理過(guò)的氧化鋁色譜柱進(jìn)行凈化，再用液相色譜法將維生素K1分離，測(cè)定色譜峰，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣品中的維生素k1的含量。

色譜條件：C18的色譜柱，比如250mm長(zhǎng)，4.6mm內(nèi)徑，5um粒徑，柱溫20℃；以乙酸水和甲醇為流動(dòng)相，流速為0.5-1ml/min。進(jìn)樣量5-10ul，紫外檢測(cè)器，波長(zhǎng)254nm等。僅供參考，如需測(cè)試，需要重新驗(yàn)證或開(kāi)發(fā)。

標(biāo)準(zhǔn)曲線：使用維生素k1的標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇進(jìn)行溶解，成倍的，梯度稀釋5-7個(gè)點(diǎn)，在檢測(cè)器的線性范圍內(nèi)。根據(jù)色譜條件，測(cè)出各個(gè)濃度點(diǎn)的色譜峰。對(duì)色譜峰面積進(jìn)行積分，對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，在坐標(biāo)軸上描點(diǎn)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程，相關(guān)系數(shù)r2＞0.999。

樣品測(cè)定：將處理好的樣品，或進(jìn)行必要的稀釋?zhuān)M(jìn)樣到hplc中，記錄色譜峰和數(shù)據(jù)。對(duì)色譜峰面積也進(jìn)行積分，根據(jù)回歸方程，可以計(jì)算出樣品中的維生素k1的含量。